| 抗人红细胞单链抗体（ScFv）-伪狂犬病毒（PRV）gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测 |
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| 引用本文： | 廖文军,覃绍敏,吴健敏,王仰杰,白安斌,覃建飞.抗人红细胞单链抗体（ScFv）-伪狂犬病毒（PRV）gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测[J].农业生物技术学报,2010,18(3):562-566. |
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| 作者姓名： | 廖文军 覃绍敏 吴健敏 王仰杰 白安斌 覃建飞 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院,南宁,530005;广西兽医研究所,南宁,530001
2. 广西兽医研究所,南宁,530001 |
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| 基金项目： | 广西壮族自治区科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 利用特异性引物从重组质粒pMD-2E8ScFv和pMD-gE中PCR扩增出2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区),采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分子2E8kgE,经BamH I和EcoR I双酶切,纯化后,克隆至BamH I和EcoR I双酶切的表达载体pET-Trx中,构建了原核表达载体pET-Trx-2E8kgE;将pET-Trx-2E8kgE转化至BL21plysS中,在IPTG诱导下表达具有双功能的融合蛋白,经过SDS-PAGE和Western-blot检测;结果表明,重组菌BL21plysS表达出约60.1 kD的目的蛋白,与猪伪狂犬标准阳性血清发生特异性反应.红细胞凝集试验证实,2E8kgE融合蛋白既能够与人红细胞结合,又能够与PRV抗体反应,具有双功能特性.
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| 关 键 词： | 猪伪狂犬病毒 gE基因 抗人红细胞单链抗体 原核表达 |
Construction and Biological Activity Detection of an Anti-Human Red Blood Cell Single Chain Fragment Variable-Pseudorabies Virus gE Bifunctional Fusion Protein |
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| Liao Wenjun,Qin Shaomin,Wu Jianmin,Wang Yangjie,Bai Anbin,Qin Jianfei.Construction and Biological Activity Detection of an Anti-Human Red Blood Cell Single Chain Fragment Variable-Pseudorabies Virus gE Bifunctional Fusion Protein[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(3):562-566. |
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| Authors: | Liao Wenjun Qin Shaomin Wu Jianmin Wang Yangjie Bai Anbin Qin Jianfei |
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