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| 猫白介素-18基因的克隆、序列分析及其表达 | |
| 引用本文： | 乔军,夏咸柱,杨松涛,鞠会艳,黄耕.猫白介素-18基因的克隆、序列分析及其表达[J].农业生物技术学报,2007,15(2):198-202. |
| 作者姓名： | 乔军 夏咸柱 杨松涛 鞠会艳 黄耕 |
| 作者单位： | 1. 解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;中国农业科学院兰州兽医研究所,兰州,730046 2. 解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062 3. 解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;吉林大学农学部,长春,130118 |
| 摘 要： | 用猫白介素18(interleukin,IL-18)基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后猫外周血单核细胞(PBMCf)总RNA进行了RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定。结果该基因全长579bp,编码192个氨基酸(GenBank登录号:DQ100372)。在推导的猫IL-18氨基酸序列中,无信号肽序列和潜在的N-联糖基化位点,但存在4个Cys残基。与不同物种IL-18相比,猫IL-18与犬、羊、牛和猪IL-18核苷酸序列有较高的同源性,分别为89.8%、88.6%、88.4%和88.1%,但与小鼠和鸡IL-18有明显的种属差异。将目的基因片段进一步亚克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET28a中构建了重组质粒pETIL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG诱导。结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到分子量为27.5kD的重组目的蛋白。经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占菌体蛋白的13.6%。 |
| 关 键 词： | 猫白介素-18基因 克隆 序列分析 大肠杆菌表达 |
| 文章编号： | 1006-1304（2007）02-0198-05 |
| 收稿时间： | 2006-04-10 |
| 修稿时间： | 2006-05-18 |
Cloning and Sequence Analysis of Feline Interleukin-18 Gene and Its Expression in Escherichia coli |
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| QIAO Jun,XIA Xian-zhu,YANG Song-tao,JU Hui-yan,HUANG Geng.Cloning and Sequence Analysis of Feline Interleukin-18 Gene and Its Expression in Escherichia coli[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2007,15(2):198-202. | |
| Authors: | QIAO Jun XIA Xian-zhu YANG Song-tao JU Hui-yan HUANG Geng |
| Institution: | 1. Institute of Military Veterinary, Military Academy of Medical Sciences, Changchun 130062, China; 2. Department of Agricultural Sciences, Jinlin University, Changchun 130118, China; 3. Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | feline interleuk-18 gene cloning sequence analysis expression in Escherichia coli |
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