| 嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶活性片段的表达和对小鼠的免疫试验 |
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| 引用本文： | 任燕,陆承平,姚火春.嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶活性片段的表达和对小鼠的免疫试验[J].农业生物技术学报,2006,14(6):875-878. |
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| 作者姓名： | 任燕 陆承平 姚火春 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,南京,210095 |
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| 基金项目： | 江苏省攻关(三药)项目 |
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| 摘 要： | 为确定嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila,Ah)J-1株温敏胞外蛋白酶EprJ1的表达产物是否具有酶活性和抗原性及测定对小鼠的相对保护率,根据eprJ1基因ORF阅读框的序列设计1对引物,扩增出不含信号肽序列的EprJ1成熟蛋白结构基因(850bp),经EcoRⅠ/SalⅠ双酶切后连接pET-32a( ),转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21。在30℃经IPTG诱导后,重组菌冻融液在脱脂奶平板上经28℃和24h孵育检测有透明溶蛋白圈出现,经56℃和30min处理后则无。纯化的重组蛋白免疫小鼠后,用1.0×107cfu的AhJ-1(50LD50)腹腔注射攻击小鼠,重组蛋白对小鼠的相对保护率可达60%。免疫印迹显示,AhJ-1胞外产物的抗血清可以识别该融合蛋白,但AhJ-1的热稳定胞外蛋白酶ECPase54抗血清不能识别该融合蛋白。重组蛋白分子量约53.2kD,有温敏蛋白酶活性和抗原性。
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| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 温敏胞外蛋白酶 融合表达 相对保护率 |
| 文章编号： | 1006-1304（2006）06-0875-04 |
| 收稿时间： | 2005-11-04 |
| 修稿时间： | 2005-11-12 |
Expression of the Active Fragment of an Extracellular Temperature-labile Protease from Aeromonas hydrophila and Its Immune Effect on Mice |
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| REN Yan,LU Cheng-ping,YAO Huo-chun.Expression of the Active Fragment of an Extracellular Temperature-labile Protease from Aeromonas hydrophila and Its Immune Effect on Mice[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2006,14(6):875-878. |
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| Authors: | REN Yan LU Cheng-ping YAO Huo-chun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aeromonas hydrophila extracellular temperature-labile protease fusion expression relative percentage survival (RPS) |
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