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白菜类富含亮氨酸重复(LRR)抗病蛋白基因BcLRR cDNA克隆及其介导的植物软腐病抗性分析
引用本文:谢华,陈绪清,朱朗,贾云鹤,姚磊,崔崇士,马荣才.白菜类富含亮氨酸重复(LRR)抗病蛋白基因BcLRR cDNA克隆及其介导的植物软腐病抗性分析[J].农业生物技术学报,2010,18(3):416-423.
作者姓名:谢华  陈绪清  朱朗  贾云鹤  姚磊  崔崇士  马荣才
作者单位:1. 北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京,100097;首都师范大学生命科学院,北京,100037
2. 北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京,100097
3. 中国农业大学生物学院,北京,100193
4. 东北农业大学园艺学院,哈尔滨,150030
基金项目:国家高技术研究发展规划(863计划),北京市自然科学基金重点项目 
摘    要:利用前期构建的软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora subsp.carotovora)菌株BC1侵染诱导表达的大白莱(Brassica campestris subsp.pekinensis)SSH cDNA文库和cDNA芯片.在芯片分析的基础上,选取一个与拟南芥(Arabidopsis thaliana)类富含亮氨酸重复(LRR)抗病蛋白Cf-5高度同源的EST序列(GenBank登录号:DN962361)进行进一步分析.用5'-和3'-RACE方法克隆了该基因全长1 286 bp的cDNA序列,包含一个完整ORF和3'UTR,并具有Poly(A)加尾信号,将其命名为BcLRR基因(GenBank登录号:EU424347).BcLRR推导蛋白序列由327个氨基酸组成,除N端跨膜螺旋结构域外,大部分为LRR结构域,包含8个胞外LRR重复单元,由7个规范的LXXLXLXN结构和1个不规范LXXLXXXN组成.氨基酸序列比对分析发现,BeLRR蛋白与拟南芥类LRR抗病蛋白Cf-5同源性高达96.6%,与棉花(Gossypium hirsutum L.)类LRR抗病蛋白GhLRR同源性为82.3%,它们之间大部分变异限定在N端信号肽区.系统发育关系表明,在三种植物中功能均未知的这一蛋白属于一个新的胞外LRR蛋白类型,在结构上不同于其它抗性已知的胞外型LRR蛋白.将受CaMV 35S启动子驱动的BcLRR基因完整ORF序列转化拟南芥Col-0,PCR鉴定、Southern杂交和RT-PCR分析表明,BcLRR基因已整合到拟南芥基因组中,并在拟南芥中获得了转录.软腐病病情指数分析表明,转BcLRR植株提高了对软腐欧文氏菌的抗性.

关 键 词:大白菜  cDNA克隆  遗传转化  软腐欧文氏菌抗性

cDNA Cloning of an Leucine-rich Repeats(LRR)-Like Disease Resistance Protein Gene BcLRR from Chinese Cabbage and its Functional Analysis in Mediating Plant Resistance to Soft-rot Disease
Xie Hua,Chen Xuqing,Zhu Lang,Jia Yunhe,Yao Lei,Cui Congshi,Ma Rongcai.cDNA Cloning of an Leucine-rich Repeats(LRR)-Like Disease Resistance Protein Gene BcLRR from Chinese Cabbage and its Functional Analysis in Mediating Plant Resistance to Soft-rot Disease[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(3):416-423.
Authors:Xie Hua  Chen Xuqing  Zhu Lang  Jia Yunhe  Yao Lei  Cui Congshi  Ma Rongcai
Abstract:
Keywords:BcLRR
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