华东葡萄抗白粉病转录因子基因的克隆及亚细胞定位分析 |
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引用本文: | 黎涛,贺明阳,王跃进,余皓.华东葡萄抗白粉病转录因子基因的克隆及亚细胞定位分析[J].农业生物技术学报,2010,18(4):777-782. |
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作者姓名: | 黎涛 贺明阳 王跃进 余皓 |
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作者单位: | 西北农林科技大学农业部西北园艺植物种质资源利用重点开放实验室,园艺学院,陕西省农业分子生物学实验室,杨凌,712100 |
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摘 要: | 以抗白粉病华东葡萄(Vitis pseudoreticulata W.T.Wang)株系白河-35-1为材料,在经葡萄白粉病病原菌(Uncinula necator(Schw.)Burr.)诱导后获得的EST序列的基础上,本研究通过RACE技术克隆了一个具有转录域的转录因子全长1324bpcDNA序列,其阅读框为1053bp,编码350个氨基酸,命名为VpRFL1(GenBank登录号:FJ356672)。应用PCR技术,进一步获得了转录因子VpRFL1基因的DNA序列,其序列全长1599bp,VpRFL1基因包含3个外显子,2个内含子。生物信息学分析表明,华东葡萄白河-35-1VpRFL1基因编码的氨基酸序列在N端含有核定位信号,C端含有C4C4型RING锌指结构域。VpRFL1/PBI221-GFP在洋葱(Alliumcepa)表皮细胞中的瞬时表达分析表明,该转录因子主要定位于细胞核内。VpRFL1的序列特征与定位分析结果初步表明该转录因子基因在核内起作用,并可能参与了抗逆反应的相关途径。
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关 键 词: | 华东葡萄 抗白粉病 转录因子 克隆 亚细胞定位 |
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