| 热硫化氢高温厌氧杆菌的Ttx31基因克隆、表达与功能分析 |
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| 引用本文： | 杜照奎,黄伟,谢和芳.热硫化氢高温厌氧杆菌的Ttx31基因克隆、表达与功能分析[J].农业生物技术学报,2010,18(2):356-361. |
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| 作者姓名： | 杜照奎 黄伟 谢和芳 |
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| 作者单位： | 1. 西南大学荣昌校区,重庆,402460;台州学院生命科学学院,临海,317000
2. 西南大学荣昌校区,重庆,402460 |
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| 基金项目： | 重庆市科委自然科学基金计划项目 |
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| 摘 要： | 生物信息学分析发现,热硫化氢高温厌氧杆菌(Thermowmerobacter thermohydrosulfuricus)的α-淀粉酶/普鲁兰糖酶(α-amylase/pullulanase)基因中的一段未知功能序列Ttx31可能编码碳水化合物结合结构域(carbohydrate binding module,CBM),但其结合特性未知.本实验以T. thermohydrosulfuricus为材料,通过菌落PCR扩增其Tts31序列,将获得的Ttx31克隆到表达载体pET22b(+)中得到重组质粒pEX31,序列分析表明,所得重组表达载体pEX31中的Ttx31序列正确.将重组载体pEX31转入大肠杆菌宿主表达菌Tuner中,IPTG诱导表达后纯化,采用SDS-PAGE电泳和非变性亲和凝胶电泳法,研究重组表达的目的蛋白TtX31与糖的相互作用.结果发现,TtX31能结合糊精,但不能结合可溶性淀粉、普鲁兰糖、支链淀粉等.实验结果可以认为TtX31是一种功能性的新碳水化合物结合结构域,可以结合糊精.
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| 关 键 词： | 热硫化氢高温厌氧杆菌 碳水化合物结合结构域 菌落PCR 糊精结合结构域 |
Cloning, Expression and Function Analysis of Novel Carbohydrate Binding Module Ttx31 from T.thermohydrosulfuricus |
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| Du Zhaokui,Huang Wei,Xie Hefang.Cloning, Expression and Function Analysis of Novel Carbohydrate Binding Module Ttx31 from T.thermohydrosulfuricus[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(2):356-361. |
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| Authors: | Du Zhaokui Huang Wei Xie Hefang |
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| Institution: | Du Zhaokui1,2 Huang Wei1 Xie Hefang1 1 Rongchang Campus,Southwest University,Chongqing,402460,2 School of Life Science,Taizhou University,Linhai,317000 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Thermoanaerobacter thermohydrosulfuricus Carbohydrate binding module Colony PCR Dextrin binding module |
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