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宇佐美曲霉木聚糖酶(xynⅡ)基因在大肠杆菌中的表达
引用本文:周晨妍,白剑宇,邬敏辰,王武.宇佐美曲霉木聚糖酶(xynⅡ)基因在大肠杆菌中的表达[J].农业生物技术学报,2007,15(3):514-518.
作者姓名:周晨妍  白剑宇  邬敏辰  王武
作者单位:1. 江南大学生物工程学院,无锡,214064
2. 江南大学医学院,无锡,214064
基金项目:江南大学校科研和教改项目
摘    要:根据宇佐美曲霉(Aspergill ususamii)E001菌株木聚糖酶xynⅡcDNA序列(GenBank登录号为DQ114485),合成1对引物(含EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点),以重组质粒pUCm-T-xynⅡ为模板,扩增得到编码xynⅡ成熟肽的cDNA片段(555bp)。将其与表达质粒pET-28a连接,构建重组表达质粒pET-28a-xynⅡ,并转化大肠杆菌(Escherichia.coli)BL21-CodonPlus(DE3)-RIL,获得重组工程菌BL21xynⅡ。经IPTG诱导表达,木聚糖酶的比酶活力最高可达35.6Umg。最后采用金属Ni2 螯和层析柱对所表达的木聚糖酶进行纯化,获得电泳纯的木聚糖酶。重组表达的木聚糖酶最适温度为45℃,最适pH4.6。

关 键 词:宇佐美曲霉  木聚糖酶  表达  酶学性质
文章编号:1006-1304(2007)03-0514-05
收稿时间:2006-10-11
修稿时间:2006-10-112006-12-22

Expression ofAspergillus usamii Xylanase (xyn Ⅱ) Gene in Escherichia coli
ZHOU Chen-yan,BAI Jian-yu,WU Min-chen,WANG Wu.Expression ofAspergillus usamii Xylanase (xyn Ⅱ) Gene in Escherichia coli[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2007,15(3):514-518.
Authors:ZHOU Chen-yan  BAI Jian-yu  WU Min-chen  WANG Wu
Institution:1. School of Biotechnology, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China; 2. Medical School, Southern Yangtze University, Wuxi 214064, China
Abstract:
Keywords:Aspergillus usamii  xylanase  expression  enzymatic properties
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