| 牛分枝杆菌MPB70基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 姜秀云,王春凤,王春芳,何昭阳.牛分枝杆菌MPB70基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].中国预防兽医学报,2005,27(6):486-489. |
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| 作者姓名： | 姜秀云 王春凤 王春芳 何昭阳 |
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| 作者单位： | 1. 吉林农业大学,生物技术学院,吉林,长春,130118
2. 吉林农业大学动物科技学院,长春,吉林,130118 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目，新材料领域项目，吉林农业大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 本研究以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板,以MPB70成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得约500bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T Vector中,成功地构建出克隆载体pGEM-T-70.以BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切pGEM-T-70和pET28a( ),并将纯化的MPB70基因亚克隆至pET28a( )中,构建出原核表达载体pET28a-70.将pET28a-70转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约25Ku外源蛋白带.Western blot分析发现,该蛋白具有牛分枝杆菌抗原性,从而为进一步研究MPB70的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定基础.
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| 关 键 词： | 牛分枝杆菌 MPB70基因 克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1008-0589(2005)06-0486-04 |
| 收稿时间： | 2004-07-01 |
| 修稿时间： | 2004年7月1日 |
Cloning and expression of mycobacterium bovis secreted protein MPB70 in E. coli |
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| JIANG Xiu-yun,WANG Chun-feng,WANG Chun-fang,HE Zhao-yang.Cloning and expression of mycobacterium bovis secreted protein MPB70 in E. coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2005,27(6):486-489. |
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| Authors: | JIANG Xiu-yun WANG Chun-feng WANG Chun-fang HE Zhao-yang |
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| Institution: | 1.CollegeofBiotechnology, Jilin Agricuhural University, Changchun 130118,China; 2.College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium bovis MPB70 gene cloning prokaryotic expression |
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