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牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定
引用本文:李超,林祥梅,余多慰,李全芬,李桂芬,韩雪清.牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定[J].动物医学进展,2010,31(4):53-56.
作者姓名:李超  林祥梅  余多慰  李全芬  李桂芬  韩雪清
作者单位:1. 南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210046
2. 中国检验检疫科学研究院,北京,100029
摘    要:通过IPTG诱导的大肠埃希菌表达重组牛干扰素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用GlutathioneSepharose 4 Fast Flow亲和层析柱进行融合蛋白的纯化,纯化后的融合蛋白BovIFN-γ作为抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA筛选,有限稀释法克隆亚克隆获得分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、亚类及稳定性进行鉴定。获得一株稳定分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株A12E9,细胞培养上清和腹水效价可达1∶3 200和1∶160 000。

关 键 词:牛γ干扰素  单克隆抗体  鉴定
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