| 转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴式数字PCR定量检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈雪娇,宗凯,孙娟娟,李云飞,郑海松,姚剑.转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴式数字PCR定量检测方法的建立[J].中国农学通报,2018,34(6):131-136. |
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| 作者姓名： | 陈雪娇 宗凯 孙娟娟 李云飞 郑海松 姚剑 |
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| 作者单位： | 安徽出入境检验检疫局技术中心,安徽出入境检验检疫局技术中心,安徽出入境检验检疫局技术中心,安徽出入境检验检疫局技术中心,安徽出入境检验检疫局技术中心,安徽出入境检验检疫局技术中心 |
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| 基金项目： | 国家质量监督检验检疫总局科技计划项目“水稻转基因成分定量检测方法研究（数字微滴PCR法）”(2015IK0003)；质检公益性行业科研专 项“花卉、水稻、棉花等重大疫病检疫关键技术研究”(201410076)。 |
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| 摘 要： | 为进一步提升转基因水稻的定量检测效率,推动转基因定量标识制度的实施,对转基因水稻品系‘Bt汕优63’成分进行微滴式数字PCR法定量检测研究。基于转基因水稻品系‘Bt汕优63’的外源插入片段和水稻蔗糖磷酸盐合成酶基因SPS,选择、设计和合成高效特异性的内外源基因引物探针,用于微滴式数字PCR法扩增‘Bt汕优63’的内源基因和品系特异序列。引物探针优化实验表明,SPS60-F/R/P和‘Bt汕优63’品系基因-F/R/P适用于dd PCR双通道法定量检测‘Bt汕优63’成分。准确度验证试验表明,测得值与标准值相近,偏差分别为0.03、0.15、0.15、0.03。测得值的SD介于0.08~0.48之间,RSD介于4.86%~15.10%之间,小于欧盟要求25%,准确度较好。本研究建立的转基因水稻品系‘Bt汕优63’微滴数字PCR定量检测方法简便高效、准确度高,可用于农产品和食品中转基因水稻‘Bt汕优63’成分的定量检测。
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| 关 键 词： | 微滴式数字PCR 双通道法 定量检测 转基因水稻 ‘Bt汕优63’ |
| 收稿时间： | 2017/3/3 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/4/7 0:00:00 |
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