| 基因打靶载体选择标记盒的构建及表达 |
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| 引用本文： | 张磊,陈刚,孙怀昌.基因打靶载体选择标记盒的构建及表达[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2002,23(2):21-23. |
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| 作者姓名： | 张磊 陈刚 孙怀昌 |
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| 作者单位： | 扬州大学畜牧兽医学院动物医学系,江苏扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家教育部骨干教师培养计划项目(200065)，江苏省教育厅普通高校新世纪学术带头人培养计划项目(200145) |
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| 摘 要： | 为构建山羊乳腺基因打靶载体的选择标记盒,将loxP位点分别引入正、反向引物,以含新霉素磷酸转移酶(neo)基因的质粒pTarget为模板,用高保真聚合酶链反应(PCR)扩增得loxP neo loxP选择标记盒。将PCR产物克隆到pGEM T载体后进行的序列分析结果显示,引入的loxP位点及扩增后的neo基因序列均是正确的。将此选择标记盒克隆到不含neo基因的真核表达载体ΔpTarget后转染COS 1细胞,经过G418筛选获得药物抗性细胞克隆。再将此选择标记盒克隆到山羊β 乳球蛋白基因打靶载体并转染山羊成纤维细胞,经过G418选择后也获得抗性细胞克隆。结果表明:克隆的loxP neo loxP选择标记盒可用于基因打靶载体的构建。
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| 关 键 词： | 基因打靶载体 选择标记盒 聚合酶链反应 表达 |
| 文章编号： | 1671-4652(2002)02-0021-03 |
| 修稿时间： | 2002年2月6日 |
CONSTRUCTION OF SELECTION CASSETTE AND ITS EXPRESSION IN EUKARYOTIC CELLS |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gene targeting vectors selection cassette polymerase chain reaction expression |
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