| 犬细小病毒VHH抗体的文库构建、表达及其鉴定 |
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| 引用本文： | 冯倩倩,王召阳,袁维峰,姜一曈,庞忠宝,朱鸿飞,贾 红.犬细小病毒VHH抗体的文库构建、表达及其鉴定[J].中国兽药杂志,2023,57(1):19-31. |
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| 作者姓名： | 冯倩倩 王召阳 袁维峰 姜一曈 庞忠宝 朱鸿飞 贾 红 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,,,,,,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目(2016YFD0501003) |
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| 摘 要： | 为构建特异性犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)的纳米抗体库，并获得特异性抗CPV的重链单域抗体(Single variable domain on a heavy chain antibodies, VHH抗体),以分离鉴定的一株CPV-2c毒株(TS02株)作为免疫原免疫羊驼，四免后采集外周血，分离淋巴细胞，利用巢式PCR扩增VHH序列，通过噬菌体展示技术成功构建了纳米抗体的CPV免疫文库，进一步通过ELISA特异性筛选具有高亲和力的抗CPV纳米抗体序列。将筛选出的抗体序列插入pcDNA3.1真核表达载体构建pcDNA3.1-VHH重组质粒，采用PEI转染高密度的HEK293F悬浮细胞，瞬时表达、纯化VHH,进行鉴定。结果表明，四次免疫后羊驼血清效价高达1∶25000,达到了建库要求，构建的纳米抗体的CPV免疫文库，库容达2×106 CFU/mL,文库多样性良好。通过特异性筛选获得了4株具有高亲和力和特异性的抗CPV纳米抗体序列，采用HEK293F细胞瞬时表达并纯化获得4个重组VHH,分别是CPV-VHH-H1、CPV-VHH-D4、CP...
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| 关 键 词： | 犬细小病毒 VHH抗体 噬菌体文库 真核表达 |
| 收稿时间： | 2022/10/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2022/12/14 0:00:00 |
Library Construction,Expression and Identification of Canine Parvovirus VHH Antibody |
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| Institution: | Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences,,,,,, |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | canine parvovirus VHH antibody phage library expression identification |
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