| TMV和CMV病毒外壳蛋白基因双靶向的RNA干涉载体构建 |
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| 引用本文： | 尹蕾,唐凯悦,张跃新,李猷,律凤霞. TMV和CMV病毒外壳蛋白基因双靶向的RNA干涉载体构建[J]. 湖北农业科学, 2016, 0(3): 759-763. DOI: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.03.054 |
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| 作者姓名： | 尹蕾 唐凯悦 张跃新 李猷 律凤霞 |
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| 作者单位： | 牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江,157012 |
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| 基金项目： | 国家烟草专卖局科技项目(110200401008)，牡丹江市科技局科技项目(Z2012n0012) |
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| 摘 要： | 依据RNA干扰机制构建多病毒基因靶向的RNA干涉双元载体系统,为培育抗病毒复合侵染的番茄品种提供遗传转化载体。以烟草病毒病(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)病毒外壳蛋白基因作为RNA干扰靶标基因,针对病毒株系间外壳蛋白基因同源区域设计靶序列引物,经RT-PCR获得两段靶标基因的DNA靶序列。借助T载体将两段靶序列连接成一条DNA序列。酶切后正向、反向锚定连接到p UCCRNAi中间载体的克隆位点,形成靶序列在载体中的双向重复结构;重复结构酶切后插入含超强启动子的p C2300-35s-OCS表达载体,重组的表达载体质粒电击转化到只含辅助质粒的根癌农杆菌中,完成RNAi双元载体系统的构建。
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| 关 键 词： | 烟草病毒病(TMV) 黄瓜花叶病毒(CMV) 番茄 RNA干涉 载体构建 |
Construction of RNA Interference Vectoer in TWO-Gene-Targeted of TMV and CMV |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tobacco mosaic virus cucumber mosaic virus tomato RNA interference vectoer construction |
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