首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
     检索      

TMV和CMV病毒外壳蛋白基因双靶向的RNA干涉载体构建
引用本文:尹蕾,唐凯悦,张跃新,李猷,律凤霞.TMV和CMV病毒外壳蛋白基因双靶向的RNA干涉载体构建[J].湖北农业科学,2016(3):759-763.
作者姓名:尹蕾  唐凯悦  张跃新  李猷  律凤霞
作者单位:牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江,157012
基金项目:国家烟草专卖局科技项目(110200401008),牡丹江市科技局科技项目(Z2012n0012)
摘    要:依据RNA干扰机制构建多病毒基因靶向的RNA干涉双元载体系统,为培育抗病毒复合侵染的番茄品种提供遗传转化载体。以烟草病毒病(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)病毒外壳蛋白基因作为RNA干扰靶标基因,针对病毒株系间外壳蛋白基因同源区域设计靶序列引物,经RT-PCR获得两段靶标基因的DNA靶序列。借助T载体将两段靶序列连接成一条DNA序列。酶切后正向、反向锚定连接到p UCCRNAi中间载体的克隆位点,形成靶序列在载体中的双向重复结构;重复结构酶切后插入含超强启动子的p C2300-35s-OCS表达载体,重组的表达载体质粒电击转化到只含辅助质粒的根癌农杆菌中,完成RNAi双元载体系统的构建。

关 键 词:烟草病毒病(TMV)  黄瓜花叶病毒(CMV)  番茄  RNA干涉  载体构建

Construction of RNA Interference Vectoer in TWO-Gene-Targeted of TMV and CMV
Abstract:
Keywords:tobacco mosaic virus  cucumber mosaic virus  tomato  RNA interference  vectoer construction
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号