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荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
引用本文:岳华,黄兴,杨发龙,李明义,范根成,马莉,汤承.荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平[J].畜牧兽医学报,2008,39(6).
作者姓名:岳华  黄兴  杨发龙  李明义  范根成  马莉  汤承
作者单位:1. 西南民族大学生命科学与技术学院,成都,610041
2. 西南民族大学生命科学与技术学院,成都,610041;成都农业科技职业学院,成都,611130
3. 中国动物卫生与流行病学中心,青岛,266032
基金项目:国家科技支撑计划重大项目,四川省应用基础研究计划 
摘    要:白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并采用该方法对26-50日龄商品鸡外周血淋巴细胞(PBL)中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示:所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线性范围分别在10^-4-10^-9和10^-3-10^-9;相关系数分别为0.998 0和0.999 9;最低分别能检测105和120拷贝;熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰;组内变异系数分别在1.13%-2.15%和1.17%-3.68%,组间变异系数分别在1.16%-3.25%和1.66%-2.86%。26-50日龄鸡PBL CD4和CD8的mRNA表达水平有小幅波动,与采用流式细胞术检测结果的报道一致。本试验建立的RRT-PCR方法敏感性高、稳定性和再现性好,为检测鸡CD4、CD8基因表达水平提供了精确定量的新方法。

关 键 词:荧光定量RT-PCR    CD4  CD8  mRNA

Development of Real-time RT-PCR for Detecting the Expression Level of CD4 and CD8 mRNA in Chicken
YUE Hua,HUANG Xing,YANG Fa-long,LI Ming-yi,FAN Gen-cheng,MA Li,TANG Cheng.Development of Real-time RT-PCR for Detecting the Expression Level of CD4 and CD8 mRNA in Chicken[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(6).
Authors:YUE Hua  HUANG Xing  YANG Fa-long  LI Ming-yi  FAN Gen-cheng  MA Li  TANG Cheng
Abstract:
Keywords:CD4  CD8  mRNA
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