| 溶藻弧菌附着定植因子ACFA原核载体构建、表达条件优化及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 刘祥.溶藻弧菌附着定植因子ACFA原核载体构建、表达条件优化及多克隆抗体制备[J].华北农学报,2015(1). |
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| 作者姓名： | 刘祥 |
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| 作者单位： | 陕西理工学院 生物科学与工程学院,陕西 汉中,723001 |
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| 基金项目： | 陕西省教育厅科学研究计划项目(2013JK0723)；陕西理工学院人才启动项目 |
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| 摘 要： | 为构建水产致病菌溶藻弧菌附着定植因子ACFA原核表达载体,优化ACFA蛋白的诱导表达条件,制备ACFA蛋白小鼠多克隆抗体。通过分子克隆获得ACFA蛋白的表达菌株,利用切胶纯化获得ACFA蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3 200倍,Western-Blotting法检测抗血清特异性较好。通过正交试验,获得ACFA菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值0.5,加IPTG终浓度0.3 mmol/L,诱导时间8 h,诱导温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0,转速230 r/min,装液量50 m L。
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| 关 键 词： | 溶藻弧菌 ACFA蛋白 正交试验 多克隆抗体 |
Construction Prokaryotic Vector,Optimization Expression Conditions and Polyclonal Antibody Preparation of Vibrio alginolyticus Accessory Colonization Factor ACFA |
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| LIU Xiang.Construction Prokaryotic Vector,Optimization Expression Conditions and Polyclonal Antibody Preparation of Vibrio alginolyticus Accessory Colonization Factor ACFA[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2015(1). |
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| Authors: | LIU Xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vibrio alginolyticus ACFA protein Orthogonal experiment Polyclonal antibody |
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