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橘色双冠丽鱼黑素皮质素受体1基因(MC1R)整胚原位杂交
作者姓名:潘贤辉  宋红梅  周康奇  汪学杰  刘奕  牟希东  余梵冬  杨叶欣  刘超  郑曙明  胡隐昌
作者单位:中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380;西南大学, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 重庆 402460,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380;西南大学, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 重庆 402460,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380,西南大学, 淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 重庆 402460,中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业农村部休闲渔业重点实验室, 广东 广州 510380
基金项目:广东省自然科学基金(2015A030313700);国家自然科学基金青年科学基金(802037);广东省渔港建设和渔业产业发展专项(A201601C09)
摘    要:为探究黑素皮质素受体1基因(MC1R)在橘色双冠丽鱼胚胎发育和体色形成过程中的表达定位及功能,本研究首先制备了MC1R基因的RNA正反义探针,T7方向转录的正义RNA探针质量浓度为447.529 ng/μL,SP6方向转录的反义RNA探针质量浓度为342.698 ng/μL。经10~20倍稀释后的探针用于原位杂交,MC1R基因探针表达定位显示,随橘色双冠丽鱼胚胎的发育杂交信号总体呈逐渐减弱趋势,原肠期和视泡期其卵黄和胚体侧卧部分有杂交信号分布;出膜期其脊柱、卵黄囊及其内容物和色素细胞内出现杂交信号;出膜期第1天,卵黄表面有信号分布。总体来看,杂交信号在脊索、卵黄囊、卵黄囊内容物质及色素细胞有特异表达,而以正义探针作为阴性对照组在5个胚胎阶段均无任何信号,杂交信号显现的MC1R表达定位说明其在橘色双冠丽鱼色素细胞的分化、迁移中起到重要调控作用,也与神经、营养、免疫功能相关,初步建立了鱼类体色相关基因功能和定位研究的整胚原位杂交方法。

关 键 词:橘色双冠丽鱼  黑素皮质素受体1  整胚原位杂交  定位分析  探针  MC1R
收稿时间:2018-05-02
修稿时间:2018-12-12
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