lncRNA2099对猪前脂肪细胞增殖、分化标志基因的影响

为了探究lncRNA2099对猪前脂肪细胞增殖分化的影响，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测lncRNA2099在猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背肌和背脂及离体培养的前体脂肪细胞增殖和分化阶段的表达水平；利用核质分离技术确定lncRNA2099在脂肪细胞中的表达位置；构建真核表达载体pcDNA3.1-lncRNA2099,采用qRT-PCR技术检测在脂肪细胞内过表达该lncRNA后对脂肪细胞增殖、分化相关标志基因表达的影响。结果显示：lncRNA2099存在明显组织表达特异性，且在肾脏和背脂中高表达，在背肌中不表达；lncRNA2099在猪前脂肪细胞增殖阶段12 h表达量最高，随后逐渐降低。在分化阶段第2天表达量最高，随后逐渐降低。核质定位结果表明，lncRNA2099在细胞核与细胞质中均有表达；在脂肪细胞内过表达lncRNA2099后，增殖标志基因P21与成脂分化标志基因LPL表达量极显著升高。lncRNA2099可能作为转录调节因子抑制猪前脂肪细胞增殖、促进成脂分化。