| 猪鼻支原体3-磷酸甘油醛脱氢酶表达及黏附细胞功能研究 |
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| 引用本文： | 潘垄基,李俊,王佳,刘蓓蓓,袁厅,谢星,王丽,韦艳娜,冯志新,邵国青,吴庆侠,熊祺琰.猪鼻支原体3-磷酸甘油醛脱氢酶表达及黏附细胞功能研究[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2020,41(3):16-20,36. |
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| 作者姓名： | 潘垄基 李俊 王佳 刘蓓蓓 袁厅 谢星 王丽 韦艳娜 冯志新 邵国青 吴庆侠 熊祺琰 |
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| 作者单位： | 西藏农牧学院动物科学学院,西藏林芝860000;江苏省农业科学院兽医研究所,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所,南京210014;西藏农牧学院动物科学学院,西藏林芝860000 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金;江苏省"六大人才高峰"高层次人才项目;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 利用原核表达载体pET-28a(+)构建猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis, Mhr)的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)重组表达菌,研究GAPDH黏附宿主细胞的功能。结果表明:成功构建了表达rMhr-GAPDH的重组工程菌,利用IPTG诱导蛋白表达,镍柱亲和层析纯化,成功获得高纯度的rMhr-GAPDH重组蛋白。用重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,对Mhr液体培养物和固体菌落进行免疫杂交,均可检测到GAPDH,提示其可表达于菌体表面。将rMhr-GAPDH蛋白与人气道上皮细胞NCI-H292共孵育,利用间接免疫荧光试验可检测到黏附在细胞上的重组蛋白,利用微孔板黏附试验进一步证明rMhr-GAPDH蛋白与细胞膜蛋白的结合具有剂量依赖性,并可为其抗体所抑制。该研究构建表达和纯化了Mhr的GAPDH重组蛋白,检测到其在菌体表面的表达,并证明其具有黏附细胞能力,这有助于进一步研究Mhr黏附感染的致病机制。
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| 关 键 词： | 猪鼻支原体 3-磷酸甘油醛脱氢酶 细胞黏附 |
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