| 利用信息肽诱导和Cre/LoxP系统构建猪链球菌基因缺失株 |
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| 引用本文： | 刘冉,陈福广,陈平,黄萌萌,朱金鲁,谢芳,孟庆文,刘思国,刘建华,张跃灵.利用信息肽诱导和Cre/LoxP系统构建猪链球菌基因缺失株[J].中国预防兽医学报,2019(2):125-130. |
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| 作者姓名： | 刘冉 陈福广 陈平 黄萌萌 朱金鲁 谢芳 孟庆文 刘思国 刘建华 张跃灵 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学动物医学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2017YFD0500203);国家自然科学基金(31772757;31500112);黑龙江省自然科学基金(C2017075) |
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| 摘 要： | 为建立一种高效的猪链球菌(Streptococcus suis)基因缺失方法,本研究利用信息肽诱导DNA片段转化和Cre/LoxP系统去除抗性基因这两种技术,通过在S.suis 05ZYH33的ssu05_1921基因上、下游片段和壮观霉素抗性基因(spc)片段之间引入LoxP位点,采用信息肽GE9诱导构建的DNA片段转化S.suis并发生重组,经抗性筛选快速获得spc替代ssu05_1921基因的缺失株;进一步引入pSET6s/PtufA-cre质粒表达Cre重组酶作用于LoxP位点,去除spc基因,产生无痕ssu05_1921基因缺失株,经测序和RT-PCR验证缺失正确。本研究建立的该方法简单、快捷、阳性率高,为构建S.suis基因缺失株、研究S.suis致病机制提供了新的选择。
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| 关 键 词： | 猪链球菌 信息肽诱导 CRE/LOXP系统 基因缺失 |
Gene deletion of Streptococcus suis by combination of pheromone induction and Cre/LoxP system |
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| LIU Ran,CHEN Fu-guang,CHEN Ping,HUANG Meng-meng,ZHU Jin-lu,XIE Fang,MENG Qing-wen,LIU Si-guo,LIU Jian-hua,ZHANG Yue-ling.Gene deletion of Streptococcus suis by combination of pheromone induction and Cre/LoxP system[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(2):125-130. |
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| Authors: | LIU Ran CHEN Fu-guang CHEN Ping HUANG Meng-meng ZHU Jin-lu XIE Fang MENG Qing-wen LIU Si-guo LIU Jian-hua ZHANG Yue-ling |
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| Institution: | (College of Veterinary Medicine,Xinjiang Agricultural University Wulumuqi 8300533,China;State Key Laboratory of VeterinaryBiotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150069,China) |
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| Abstract: | LIU Ran;CHEN Fu-guang;CHEN Ping;HUANG Meng-meng;ZHU Jin-lu;XIE Fang;MENG Qing-wen;LIU Si-guo;LIU Jian-hua;ZHANG Yue-ling(College of Veterinary Medicine,Xinjiang Agricultural University Wulumuqi 8300533,China;State Key Laboratory of VeterinaryBiotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150069,China) |
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| Keywords: | Streptococcus suis pheromone induction Cre/LoxP system gene deletion |
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