| 塞内卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 王淑娟,王东方,赵月龙,谢彩华,赵雪丽,马震原,王华俊,杨朋霞,闫若潜.塞内卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国预防兽医学报,2019(5):479-483. |
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| 作者姓名： | 王淑娟 王东方 赵月龙 谢彩华 赵雪丽 马震原 王华俊 杨朋霞 闫若潜 |
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| 作者单位： | 河南省动物疫病预防控制中心;河南科技大学动物科技学院;河南农业大学牧医工程学院 |
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| 基金项目： | 河南省科技创新人才计划项目“猪重要疫病快速检测集成技术研究”(174200510003) |
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| 摘 要： | 为建立塞内卡病毒(SVA)荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)检测方法,本研究根据GenBank中SVA 3D基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以SVA cDNA为模板,经优化反应条件,建立了SVA FQ-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对28份临床疑似SVA感染样品进行了检测,并与本实验室建立的SVA RT-PCR方法检测结果及测序结果比较分析。结果显示,该方法仅对SVA出现阳性扩增信号,对BHK-21正常细胞对照和口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒等5种病原均未出现扩增,特异性较强;该方法最低检测限为10.4拷贝/μL质粒标准品,比常规RT-PCR敏感性高10倍,敏感性较高;该方法批内及批间变异系数均小于4%,重复性好。利用该方法对28份疑似SVA感染样品检测显示,检出9份阳性样品,与测序结果一致,而常规RT-PCR仅检出6份阳性样品,其敏感性高于常规RT-PCR方法,两种方法的符合率为89.3%。本研究为SVA的早期检测提供了特异、敏感、快速的方法。
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| 关 键 词： | 塞内卡病毒 荧光定量RT-PCR 建立 应用 |
Establishment and application of fluorescence quantitative RT-PCR assay for detection of Senecavirus A |
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| WANG Shu-juan,WANG Dong-fang,ZHAO Yue-long,XIE Cai-hua,ZHAO Xue-li,MA Zhen-yuan,WANG Hua-jun,YANG Peng-xia,YAN Ruo-qian.Establishment and application of fluorescence quantitative RT-PCR assay for detection of Senecavirus A[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(5):479-483. |
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| Authors: | WANG Shu-juan WANG Dong-fang ZHAO Yue-long XIE Cai-hua ZHAO Xue-li MA Zhen-yuan WANG Hua-jun YANG Peng-xia YAN Ruo-qian |
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| Institution: | (Henan Centre for Animal Disease Control & Prevention,Zhengzhou 450008,China;College of Animal Science and Technology,Henan University of Science and Technol-ogy,Luoyang 471003,China;College of Animal Science and Veterinary Medicine,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450002,China) |
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| Abstract: | WANG Shu-juan;WANG Dong-fang;ZHAO Yue-long;XIE Cai-hua;ZHAO Xue-li;MA Zhen-yuan;WANG Hua-jun;YANG Peng-xia;YAN Ruo-qian(Henan Centre for Animal Disease Control & Prevention,Zhengzhou 450008,China;College of Animal Science and Technology,Henan University of Science and Technol-ogy,Luoyang 471003,China;College of Animal Science and Veterinary Medicine,Henan Agricultural University,Zhengzhou 450002,China) |
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| Keywords: | Senecavirus A FQ-PCR establishment application |
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