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表达NDV HN和IBDV VP2融合蛋白的重组减毒沙门菌的构建及其生物学特性分析
引用本文:贾艳艳,刘莎莎,丁轲,何雷,余祖华,李静,郁川,廖成水,程相朝,李银聚,殷月兰,张春杰. 表达NDV HN和IBDV VP2融合蛋白的重组减毒沙门菌的构建及其生物学特性分析[J]. 中国预防兽医学报, 2019, 0(6): 567-572
作者姓名:贾艳艳  刘莎莎  丁轲  何雷  余祖华  李静  郁川  廖成水  程相朝  李银聚  殷月兰  张春杰
作者单位:河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室;洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室;江苏省人兽共患病学重点实验室
基金项目:国家自然基金项目(31572489);河南省自然科学基金(182300410078);河南科技大学省部级科技创新平台培育项目(2015SPT004);江苏省人兽共患病学重点实验室开放课题(R1603)
摘    要:为构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN和传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2融合蛋白的重组减毒沙门菌,并分析其生物学特性。本研究扩增了NDVHN和IBDVVP2主要抗原基因片段,通过重叠延伸PCR扩增获得HN-VP2融合基因,构建重组质粒pYA-HN-VP2,将该重组质粒电转化至减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔcyaΔasd中,获得表达HN-VP2融合蛋白的减毒重组菌SL1344ΔcrpΔcyaΔasd(pYA-HN-VP2),并分析其生化特性、遗传稳定性和毒力等生物学特性。Westernblot结果显示,重组减毒沙门菌可分泌表达HN-VP2融合蛋白,大小为84ku,且该融合蛋白分别能与相应特异性阳性血清发生反应;生物学特性结果显示,重组菌株失去了利用麦芽糖、山梨醇及乳糖等碳源的能力,其生长速度显著慢于野生菌株SL1344;毒力较野生菌株至少下降5个对数单位,且能够稳定遗传重组质粒pYA-HN-VP2。本研究为鸡新城疫-传染性法氏囊病-沙门菌病的三联口服疫苗研制奠定重要基础。

关 键 词:减毒沙门菌  传染性法氏囊病  新城疫  构建  生物学特性

Construction and biological characteristics analysis of recombinant attenuated Salmonella expressing IBDV VP2 and NDV HN fusion protein
JIA Yan-yan,LIU Sha-sha,DING Ke,HE Lei,YU Zu-hua,LI Jing,YU Chuan,LIAO Cheng-shui,CHENG Xiang-chao,LI Yin-ju,YIN Yue-lan,ZHANG Chun-jie. Construction and biological characteristics analysis of recombinant attenuated Salmonella expressing IBDV VP2 and NDV HN fusion protein[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2019, 0(6): 567-572
Authors:JIA Yan-yan  LIU Sha-sha  DING Ke  HE Lei  YU Zu-hua  LI Jing  YU Chuan  LIAO Cheng-shui  CHENG Xiang-chao  LI Yin-ju  YIN Yue-lan  ZHANG Chun-jie
Affiliation:(The Key Laboratory of Animal Disease and Public Health/Henan University of Science and Technology,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471023,China;Luoyang Key Laboratory of Live Carrier Biomaterial and Animal Disease Prevention and Control,Luoyang 471023,China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis,Yangzhou 225009,China)
Abstract:JIA Yan-yan;LIU Sha-sha;DING Ke;HE Lei;YU Zu-hua;LI Jing;YU Chuan;LIAO Cheng-shui;CHENG Xiang-chao;LI Yin-ju;YIN Yue-lan;ZHANG Chun-jie(The Key Laboratory of Animal Disease and Public Health/Henan University of Science and Technology,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471023,China;Luoyang Key Laboratory of Live Carrier Biomaterial and Animal Disease Prevention and Control,Luoyang 471023,China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis,Yangzhou 225009,China)
Keywords:attenuated salmonella  infectious bursal disease  Newcastle disease  construction  biological characteristics
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