鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌基因组消减文库的构建 |
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作者姓名: | 徐耀辉 焦新安 李求春 潘志明 黄金林 |
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作者单位: | 1. 扬州大学生物科学与技术学院;扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009;郑州牧专动物医药系,河南郑州,450011 2. 扬州大学生物科学与技术学院;扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009 3. 扬州大学生物科学与技术学院 |
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基金项目: | 国家“863”计划项目(863-2006AA10A206)和国家自然科学基金(30425031)资助. |
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摘 要: | 为了解鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的基因组差别,筛选鸡白痢沙门氏菌特有的序列,利用SSH对鸡白痢沙门氏菌C79-13(实验方)与鸡伤寒沙门氏菌Sg9(驱动方)基因组进行了比较。选择四碱基内切酶Rsa I将C79-13与Sg9基因组DNA酶切,酶切的C79-13基因组DNA分成两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR ,得到消减混合物, 将其与PCR?2.1克隆载体连接,转化感受态E.coli DH5α建立消减文库。结果共获得400个阳性克隆;筛选240个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100~2000 bp大小的片段。差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆鸡白痢沙门氏菌特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。
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关 键 词: | 玉米、郑单22、密度、产量 玉米、郑单22、密度、产量 |
修稿时间: | 2007-03-292007-04-16 |
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