| 茶树CsSNAT基因的克隆与表达分析 |
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| 引用本文： | 师聪,颜小梅,韦朝领.茶树CsSNAT基因的克隆与表达分析[J].核农学报,2020,34(5):939-947. |
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| 作者姓名： | 师聪 颜小梅 韦朝领 |
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| 作者单位： | 1徐州工程学院,食品(生物)工程学院,江苏 徐州 221018; 2安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室,安徽 合肥 230036 |
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| 摘 要： | 为明确茶树SNAT基因的序列特征和表达特点,在茶树转录组测序的基础上以茶树(Camellia sinensis)品种舒茶早为试验材料,通过SMARTTM RACE技术克隆茶树褪黑素合成途径中关键限速酶5-羟色胺-N-乙酰转移酶CsSNAT基因的cDNA全长序列,并分析其基因结构和表达模式。结果表明,CsSNAT基因序列全长1 014 bp,其中包含742 bp的完整开放阅读框(ORF),编码247个氨基酸,预测等电点7.64,蛋白分子量27.36 kDa。氨基酸序列比对显示,CsSNAT蛋白与其他高等植物的SNAT蛋白具有较高同源性,与葡萄 VvSNAT(CBI31163)同源性最高,为66.19%。诱导蛋白最佳条件为温度28℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.5 mg·L-1,诱导时间6 h,在上清液中可获得大量分子量为66 kDa的可溶性融合蛋白。实时定量 PCR 分析表明,CsSNAT在褪黑素处理6 h后表达量最高,为对照的3倍;茶尺蠖取食6 h后,CsSNAT表达显著上调。不同激素处理结果显示,CsSNAT受脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)和水杨酸(SA)诱导表达。本研究结果为5-羟色胺-N-乙酰转移酶功能研究奠定了一定的基础。
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| 关 键 词： | 茶树 5-羟色胺-N-乙酰转移酶 基因克隆 原核表达 表达分析 |
| 收稿时间： | 2018-10-09 |
Cloning and Expression Analysis of CsSNAT Gene in Tea Plant(Camellia sinensis) |
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| SHI Cong,YAN Xiaomei,WEI Chaoling.Cloning and Expression Analysis of CsSNAT Gene in Tea Plant(Camellia sinensis)[J].Acta Agriculturae Nucleatae Sinica,2020,34(5):939-947. |
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| Authors: | SHI Cong YAN Xiaomei WEI Chaoling |
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| Institution: | 1School of Chemical Engineering and Technology, Xuzhou University of Technology, Xuzhou, Jiangsu 221018; 2State Key Laboratory of Tea Plant and Biology and Utilization, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Camellia sinensis serotonin N-acetyltransferase gene clonging prokaryotic expression expression analysis |
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