| 利用qPCR法检测OsPIMT1转基因水稻中的外源片段拷贝数 |
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| 引用本文： | 魏毅东,罗曦,吴方喜,林悦龙,何炜,连玲,谢华安,张建福.利用qPCR法检测OsPIMT1转基因水稻中的外源片段拷贝数[J].福建稻麦科技,2017(4):39-42. |
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| 作者姓名： | 魏毅东 罗曦 吴方喜 林悦龙 何炜 连玲 谢华安 张建福 |
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| 基金项目： | 福建省自然科学基金项目，国家自然科学基金项目，福建省科技计划项目 ——省属公益类科研院所基本科研专项，福建省农业科学院青年英才计划项目，福建省农业科学院杰出青年人才基金 |
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| 摘 要： | 水稻转化过程中,多个拷贝数整合到基因组中影响遗传稳定性和基因表达。传统的Southern杂交检测法鉴定费时费力,不适合目前高通量和自动化的检测要求。因此研究通过比较定量除草剂草铵膦抗性基因(bar)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2,建立了基于实时荧光定量PCR的拷贝数检测法。利用此体系对9个独立的异天冬氨酸甲基转移酶OsPIMT1转基因T0代植株进行了荧光定量分析,其中6个为单拷贝,3个为双拷贝,经过Southern杂交和分离比分析验证,表明该方法能够快速,准确的鉴定水稻含有草铵膦抗性基因的水稻转基因植株。
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Determination of the Copy Number of Exogenous Fragment inOsPIMT1 Transgenic Rice by Quantitative Real-time PCR |
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