| 利用改进的SMART法构建花生种皮全长cDNA文库 |
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| 引用本文： | 陈华,姜宝杰,张冲,曾建斌,邓烨,庄伟建.利用改进的SMART法构建花生种皮全长cDNA文库[J].福建农业学报,2012(11):1178-1182. |
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| 作者姓名： | 陈华 姜宝杰 张冲 曾建斌 邓烨 庄伟建 |
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| 作者单位： | 福建省作物分子与细胞生物学重点实验室 |
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| 基金项目： | 科技部国际合作项目(2008DFA31150) |
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| 摘 要： | SMART法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。在研究多种构建全长cDNA文库的方法基础上,吸收和改进了SMART法,对特异引物和PCR条件进行可行性的优化,成功构建了高质量的花生种皮全长cDNA文库,改进后的方法更经济、简便易行。经过涂平板测定和酶切反应快速鉴定表明,原始文库的滴度为1.23×106cfu.mL-1,重组率达93.3%,全长率为59%。插入片段大小多在1.0～2.0kb,所占比例为70%,平均大小在1.1kb左右,采用涂平板均匀扩增得到的扩增文库滴度达到了3.84×109 cfu.mL-1,可用于长期保存。
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| 关 键 词： | SMART法 全长cDNA文库 花生种皮 |
Establishment of Full-length Peanut Testa cDNA Library by Using Modified SMART |
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| CHEN Hua,JIANG Bao-jie,ZHANG Chong,ZENG Jian-bin,DENG Ye,ZHUANG Wei-jian.Establishment of Full-length Peanut Testa cDNA Library by Using Modified SMART[J].Fujian Journal of Agricultural Sciences,2012(11):1178-1182. |
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| Authors: | CHEN Hua JIANG Bao-jie ZHANG Chong ZENG Jian-bin DENG Ye ZHUANG Wei-jian |
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| Institution: | (Fujian Key Lab of Plant Molecular and Cell Biology,Fuzhou,Fujian 350002,China) |
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