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应用多重SYBR Green—I实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高梁花叶病毒
引用本文:王洪星,张雨良,王健华,章绍延,熊国如,刘志昕.应用多重SYBR Green—I实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高梁花叶病毒[J].热带农业科学,2012,32(7).
作者姓名:王洪星  张雨良  王健华  章绍延  熊国如  刘志昕
作者单位:1. 海南大学环境与植物保护学院,海南儋州571737 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南海口571101
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南海口,571101
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务专项,现代农业产业技术体系建设专项
摘    要:基于已报道的甘蔗黄叶病毒(SugarcaneYellowLeafVirus.SCYLV)cp基因和高粱花叶病毒(Sorghummosaicvirus.SrMV)NSP基因序列设计特异性引物.建立了针对这两种病毒的实时荧光定量PCR(re矗time-quantitative,RT-qPCR)检测方法。在此基础上,利用扩增产物‰值的不同,建立了可区分ScYLV与SrMV的多重SYBRGreen—I实时荧光定量PCR方法.两种病毒扩增产物的‰值分别为80.8~82.8℃和84.6~86.6℃。检测数据显示:SrMV和ScYLV均有各自的特异性峰值出现,而健康植株无特异性峰值;在单独检测中的检出水平分别可达500和250copy/ixL:两种病毒m值的批内变异系数分别为0.03%和0.0270.批间变异系数分别为2.0670和3.1270。综上所述.所建立的多重SYBRGreen—I实时荧光定量PCR方法在对以上两种病毒的检测中具有较好的特异性、敏感性和稳定性。

关 键 词:甘蔗黄叶病毒  高梁花叶病毒  SYBR  Green—I实时荧光PCR  病毒检测

Detection of Sugarcane Yellow Leaf Virus and Sorghum Mosaic Virus by Multiplex SYBR Green-I Real Time PCR
Abstract:
Keywords:ScYLV  SrMV  SYBR Green-I real time PCR  detection of viruses  multiplex
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