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| A型口蹄疫病毒VP3基因的克隆及原核表达 | |
| 作者姓名： | 刘航 杨晓燕 刘明 赵海波 郭华花 田永强 |
| 作者单位： | 兰州交通大学化学与生物工程学院,甘肃兰州,730070 |
| 摘 要： | 从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT- PCR获得cDNA.并根据FM-DV全基因组序列设计了1对针对VP3基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP3并亚克隆入pMD 18-T载体.将鉴定出的阳性质粒和表达载体PET32a用BamH Ⅰ、HindⅢ双酶切回收后连接,获得阳性重组质粒PET32-VP3.用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP3,并用SDS - PAGE进行检测,表达产物用镍亲和树脂进行纯化.结果证明口蹄疫病毒VP3蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达且表达产物得到了纯化,为实验室进一步研究提供了重要的材料. |
| 关 键 词： | A型口蹄疫病毒 VP3基因 克隆 原核表达 |
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