| 半巢式反转录实时荧光PCR检测马铃薯黑环斑病毒 |
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| 引用本文： | 耿金培,粟智平,鲁闽,许红岩,陈燕平.半巢式反转录实时荧光PCR检测马铃薯黑环斑病毒[J].中国农学通报,2009(6). |
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| 作者姓名： | 耿金培 粟智平 鲁闽 许红岩 陈燕平 |
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| 作者单位： | 烟台出入境检验检疫局,264000? |
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| 基金项目： | 山东检验检疫局课题"马铃薯重要病毒类病害实时荧光PER检测技术研究"? |
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| 摘 要： | 本研究根据基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条TaqMAN荧光探针,建立了半巢式反转录实时荧光PCR检测PBRSV的新方法.该方法采用E.Z.N.A TM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR和TaqMAN探针检测技术.第二步半巢式反转录实时荧光PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Realtime PCR等方法高.实验结果表明,该方法检测灵敏度可达300fg/μL植物总RNA.
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| 关 键 词： | 马铃薯黑环斑病毒 半巢式反转录实时荧光PCR 检测 |
Detection of potato black ringspot virus by semi-nested RT-realtime PCR |
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