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建鲤催乳素基因全长cDNA的克隆及序列分析和组织表达
作者姓名:王杰  李冰  张成锋  朱健
作者单位:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金 (2011JBFC08);现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-46)
摘    要:为了解催乳素(prolactin,PRL)的基因序列以及在建鲤渗透调节组织中的表达情况,采用同源克隆和末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)的方法分离克隆了建鲤(Cyprinus carpiovar.Jian) PRL基因全长cDNA,得到1 028 bp的全长cDNA,包括633 bp的开放阅读框(ORF),51 bp 的5′末端非编码区(UTR)以及344 bp的3′末端非编码区(UTR)。对该基因序列和推测的氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其它硬骨鱼类该基因的氨基酸序列相似度为55.02%~94.76%,与草鱼(Ctenopharyngodon idella)相似度最高(94.76%),与齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)、斑马鱼(Danio rerio)相似度稍低,与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)的相似度较低(55.02%),表明不同物种间PRL的氨基酸序列具有较高的保守性。用实时定量PCR (RT PCR)检测该基因在建鲤脑垂体、脑、肠、鳃、性腺、肝、脾、肾中PRL的相对表达量,其中脑垂体最高,其次是肝、鳃、脾、脑、肠、肾,在性腺中也有较低的表达量,表明脑垂体是建鲤PRL基因的主要表达场所,在性腺、肝、脾的表达说明其在鱼体内除了渗透调控可能还存在多种生理功能。

关 键 词:建鲤  催乳素  克隆  序列分析  组织表达
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