| 绵羊骨骼肌快速肌钙蛋白（TnCf）电子克隆及RT—PCR验证 |
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| 引用本文： | 徐秋良,张庆莉,唐光武,陈玉林.绵羊骨骼肌快速肌钙蛋白（TnCf）电子克隆及RT—PCR验证[J].郑州牧业工程高等专科学校学报,2010,30(1):1-4. |
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| 作者姓名： | 徐秋良 张庆莉 唐光武 陈玉林 |
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| 作者单位： | 1. 郑州牧业工程高等专科学校,河南,郑州,450011
2. 西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨凌,712100 |
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| 摘 要： | 传统的基因克隆有两种方法:一是建立包含目的基因的cDNA文库,根据基因的保守序列设计DNA探针,采用低严谨度的杂交获得目的基因;再者是根据基因的保守序列设计兼并引物,应用PCR技术获得目的基因,这两种方法在操作上有一定的技术难度。我们应用生物信息技术采用电子克隆的方法获得绵羊骨骼肌快速肌钙蛋白基因(TnCf)全编码序列,并用RT-PCR进行验证,结果表明:在TnCf开放阅读框483个碱基中,电子克隆与RT-PCR结果有4个碱基差异,说明电子克隆是基因克隆可靠的生物信息学辅助方法。
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| 关 键 词： | 电子克隆 表达序列标签（ESTs） 绵羊骨骼肌快速肌钙蛋白（TnCf） |
In Silico Cloning of Sheep TnCf Gene and Confirmed By RT-PCR |
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| XU Qu-liang,ZHANG Qing-li,TANG Guang-wu,CHEN Yu-lin.In Silico Cloning of Sheep TnCf Gene and Confirmed By RT-PCR[J].Journal of Zhengzhou College of Animal Husbandry Engineering,2010,30(1):1-4. |
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| Authors: | XU Qu-liang ZHANG Qing-li TANG Guang-wu CHEN Yu-lin |
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| Institution: | 1.Zhengzhou College of Animal Husbandry Engineering/a>;Henan/a>;Zhengzhou 450011/a>;China. 2.College of Animal Science and Technology/a>;Northwest A & F University/a>;Shanxi/a>;Yangling/a>;712100/a>;China |
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| Abstract: | Identification of sheep fast skeletal muscle troponin C(TnCf) gene based on its sequence conservation has two major approaches,low-stringency hybridization of cDNA libraries,and PCR method using degenerate primers.Both of the two approaches are technically difficult.In current study we have developed an in silico method to isolate the sheep TnCf gene and confirmed the in silico cloning by RT-PCR.After the completely sequencing of cloned cDNA,we found the sheep TnCf cDNA contained an open reading frame(ORF) ... |
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| Keywords: | |
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