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致猪水肿病大肠杆菌毒力因子二重PCR检测方法的建立及应用
引用本文:杨明柳,吴斌,汤细彪,蔡利军,刘国平,蔡旭旺,陈焕春.致猪水肿病大肠杆菌毒力因子二重PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽医学报,2008,28(9).
作者姓名:杨明柳  吴斌  汤细彪  蔡利军  刘国平  蔡旭旺  陈焕春
作者单位:华中农业大学,动物医学院湖北省重点实验室/农业微生物国家重点实验室,湖北,武汉,430070
摘    要:本试验分别针对志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)B亚基和F18ab茼毛fedA亚基保守序列设计2对引物,扩增长度分别为230 bp和510 bp,通过条件优化,建立了一种快速鉴定致猪水肿病大肠杆菌同时确定其致病因子的二重聚合酶链式反应(PCR)检测方法,对阳性扩增产物测序,结果都有很高的保守性.特异性试验和灵敏性试验表明:与其他6种猪常见致病菌(产毒多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、波氏杆菌、副猪嗜血杆菌、沙门菌和链球菌)无交叉反应,菌体直接扩增法最低检出量为101cfu(D600为0.002).通过该二重PCR检测方法对2004-2006年自猪肺、脑组织中分离的216株大肠杆菌进行鉴定,得到6株致猪水肿病大肠杆菌,其中3株既具有菌毛又产水肿毒素,另外3株仅产水肿毒素;菌毛阳性菌株占毒素阳性菌株的50%.

关 键 词:致猪水肿病大肠杆菌  聚合酶链式反应  水肿毒素  F18ab菌毛

Establishment and application of diplex PCR to identify pathogenicity factors of Escherichia coli eliciting edema of piglet
YANG Ming-liu,WU Bin,TANG Xi-biao,CAI Li-jun,LIU Guo-ping,CAI Xu-wang,CHEN Huan-chun.Establishment and application of diplex PCR to identify pathogenicity factors of Escherichia coli eliciting edema of piglet[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(9).
Authors:YANG Ming-liu  WU Bin  TANG Xi-biao  CAI Li-jun  LIU Guo-ping  CAI Xu-wang  CHEN Huan-chun
Abstract:
Keywords:
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