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正交设计直观分析法优化苦瓜SSR-PCR反应体系
引用本文:王心迪,黄如葵,冯诚诚,梁家作,黄熊娟,刘杏连.正交设计直观分析法优化苦瓜SSR-PCR反应体系[J].北方园艺,2016(10):99-103.
作者姓名:王心迪  黄如葵  冯诚诚  梁家作  黄熊娟  刘杏连
作者单位:1. 广西大学农学院,广西南宁530001;广西农业科学院蔬菜研究所,广西南宁530007;广西作物遗传改良生物技术重点实验室,广西南宁530007;2. 广西农业科学院蔬菜研究所,广西南宁530007;广西作物遗传改良生物技术重点实验室,广西南宁530007;3. 广西农业科学院蔬菜研究所,广西南宁,530007
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项资助项目(CARS-25),国家科技计划资助项目(2014BAD05B04),广西科学研究与技术开发计划资助项目(桂科合14125008-2-19),广西农业科学院基本科研业务专项资助项目(2015YT66).
摘    要:以苦瓜‘MC9’为试材,采用L16(45)正交实验,对苦瓜SSR-PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTPs浓度、模板DNA量、Taq聚合酶量、引物浓度等5个因素的4个水平进行优化试验,并通过正交设计直观分析法对Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq聚合酶量进行了单因素确定。结果表明:最佳反应体系为1μL 10×PCR buffer,Mg2+浓度为1.75mmol·L~(-1),dNTPs浓度为0.25mmol·L~(-1),Taq DNA聚合酶1U,DNA 100ng,引物0.20mmol·L~(-1),ddH2O补足至10μL。

关 键 词:苦瓜  正交实验  单因素设计

Orthogonal Design-direct Analysis of SSR-PCR Reaction System in Momordica charantia
WANG Xindi,HUANG Rukui,FENG Chengcheng,LIANG Jiazuo,HUANG Xiongjuan,LIU Xinglian.Orthogonal Design-direct Analysis of SSR-PCR Reaction System in Momordica charantia[J].Northern Horticulture,2016(10):99-103.
Authors:WANG Xindi  HUANG Rukui  FENG Chengcheng  LIANG Jiazuo  HUANG Xiongjuan  LIU Xinglian
Abstract:
Keywords:
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