| 肉鸡成肌细胞的分离培养与鉴定 |
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| 引用本文： | 陈凯凯,张成,赵菲,王驰,王孝成,耿照玉,姜润深. 肉鸡成肌细胞的分离培养与鉴定[J]. 中国农业大学学报, 2020, 25(9): 72-79 |
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| 作者姓名： | 陈凯凯 张成 赵菲 王驰 王孝成 耿照玉 姜润深 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学动物科技学院, 合肥 230036 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31702129);安徽省自然科学基金项目(1808085QC62);安徽省科技重大专项(17030701006) |
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| 摘 要： | 为建立肉鸡成肌细胞的体外分离、培养及鉴定体系,选取11 d鸡胚为材料,利用Ⅰ型胶原酶消化鸡胚胸肌,差速贴壁法分离纯化成肌细胞,优化成肌细胞培养条件;通过细胞形态学观察和成肌分化标志基因表达情况进行细胞鉴定,并利用含2%马血清的培养基诱导其成肌分化。结果表明:分离获得的细胞贴壁后呈纺锤形,39.5 ℃培养条件下细胞增殖速度显著高于37.0 ℃(P<0.05);经实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测分析,增殖期与分化期均有成肌细胞的特异性标志基因成肌因子5(Myogenic factor 5,Myf5)与成肌分化因子1(Myogenic differentiation 1,MyoD)的表达,且与增殖期相比,成肌细胞分化期肌细胞生成素(Myogenin,MyoG)与肌肉调节因子4(Muscle regulatory factor,MRF4)基因表达量显著升高(P<0.05);此外,细胞增殖期结蛋白(Desmin)和分化期肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,MyHC)呈阳性表达。综上,成功分离获得了肉鸡成肌细胞,并在39.5 ℃培养条件下具有更好的增殖能力,为研究肌肉发育及其营养调控机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 肉鸡 成肌细胞 鉴定 培养温度 成肌诱导分化 |
| 收稿时间： | 2020-01-06 |
Isolation, culture and identification of primary myoblasts from broiler |
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| CHEN Kaikai,ZHANG Cheng,ZHAO Fei,WANG Chi,WANG Xiaocheng,GENG Zhaoyu,JIANG Runshen. Isolation, culture and identification of primary myoblasts from broiler[J]. Journal of China Agricultural University, 2020, 25(9): 72-79 |
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| Authors: | CHEN Kaikai ZHANG Cheng ZHAO Fei WANG Chi WANG Xiaocheng GENG Zhaoyu JIANG Runshen |
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| Affiliation: | College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | broiler myoblast identification culture temperature myogenic differentiation |
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