| BHK-21细胞悬浮驯化及对新城疫病毒悬浮培养工艺研究 |
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| 引用本文： | 徐宏军,张凌云,侯 野,姜磊,董婷婷,郑杰,张乾顺,马宁宁.BHK-21细胞悬浮驯化及对新城疫病毒悬浮培养工艺研究[J].中国兽药杂志,2020,54(7):1-8. |
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| 作者姓名： | 徐宏军 张凌云 侯 野 姜磊 董婷婷 郑杰 张乾顺 马宁宁 |
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| 作者单位： | 青岛蔚蓝生物制品有限公司,,,,,,,北京鼎持生物技术有限公司 |
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| 摘 要： | 为建立新城疫病毒在BHK-21细胞的无血清全悬浮培养工艺以获得高滴度和高纯度的新城疫悬浮培养抗原,通过悬浮培养驯化和筛选获得了形态良好、稳定传代的BHK-21-sc悬浮细胞株;该细胞以初始密度0.5×10~6 cells/mL接种,培养72 h可增殖到6×10~6cells/mL,细胞活率达95%。以5 L生物反应器悬浮培养BHK-21-sc细胞,对鸡新城疫病毒La Sota株的接毒剂量、TPCK胰酶添加浓度、病毒培养温度、收获时间等工艺参数进行了摸索和优化;并在5L-16L-50L生物反应器中进行逐级放大,以优化后的鸡新城疫悬浮培养工艺进行3个批次病毒悬浮培养。最终确定鸡新城疫病毒La Sota株接种BHK-21-sc悬浮细胞株的悬浮培养工艺:BHK-21-sc细胞悬浮培养的第3天按照感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.005接种病毒,并添加终浓度为5μg/mL的TPCK胰酶,于33℃培养72 h后收获病毒液。应用该悬浮培养工艺在5、16、50 L反应器上悬浮培养BHK-21-sc悬浮细胞株生产鸡新城疫病毒HA滴度不低于9log2,病毒含量不低于10~(6.0)TCID_(50)/0.1mL。表明BHK-21-sc细胞无血清全悬浮生产鸡新城疫病毒工艺稳定,可以实现逐级放大和规模化生产。
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| 关 键 词： | BHK-21 鸡新城疫病毒 反应器 悬浮培养 |
| 收稿时间： | 2020/2/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/4/17 0:00:00 |
BHK-21 cell Suspension Adaptation and Culture Process Establishment for Newcastle Disease Virus (NDV) Production with the Suspension Cell Line |
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| Institution: | Qingdao Vland biological products co LTD,,,,,,, |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BHK-21 Newcastle disease virus Bioreactor Suspension culture |
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