K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备 |
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引用本文: | 吕璐,胡明月,邓菁菁,刘勇,李拓凡,谢菁,谢泉,邵红霞,秦爱建,叶建强. K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备[J]. 中国家禽, 2019, 0(19): 55-58 |
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作者姓名: | 吕璐 胡明月 邓菁菁 刘勇 李拓凡 谢菁 谢泉 邵红霞 秦爱建 叶建强 |
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作者单位: | 扬州大学兽医学院;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;扬州大学农业科技发展研究院;教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室 |
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基金项目: | 国家重点研发项目(2016YFD0501605);国家自然科学基金中英联合项目(31761133002、BB/R012865/1);大学生实践创新训练项目(X20180643);江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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摘 要: | 研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-KGp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光以及Westernblot试验进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究奠定了基础。
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关 键 词: | K亚群禽白血病病毒 GP85基因 多克隆抗体 |
Cloning and Expression of gp85 Gene of Avian Leukosis Virus Subgroup K and Its Polyclonal Antibody Preparation |
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Abstract: | LU Lu;HU Mingyue;DENG Jingjing |
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Keywords: | |
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