| N-端缺失突变核糖核酸酶抑制因子在毕赤酵母中的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 吴毓,王继红,吴妍宁,崔秀云,赵宝昌.N-端缺失突变核糖核酸酶抑制因子在毕赤酵母中的克隆与表达[J].水产科学,2004,23(9):19-22. |
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| 作者姓名： | 吴毓 王继红 吴妍宁 崔秀云 赵宝昌 |
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| 作者单位： | 1. 辽宁师范大学,生命科学学院,辽宁,大连,116029
2. 大连医科大学,生物化学与分子生物学教研室,辽宁,大连,116027 |
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| 摘 要： | 人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50kDa的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半胱氨酸。作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来的胰RNase的侵袭,同时做为RNase抑制剂在各实验室广为应用。HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N-末端、C-末端在空间上较为接近。本文用PCR的方法在HRIcDNA5'端去除30个碱基,并将此缺失突变的HRI的cDNA片段构建于质粒pPIC9K,PCR和双酶切鉴定结果为阳性,测序结果证实在HRIcDNA5'端成功引入30个碱基的缺失突变。电击转化入毕赤酵母(Pichiapastores)GS115中,进行分泌型表达。对表达产物进行亲和层析纯化。经SDS-PAGE和Western-blot免疫印迹杂交,证实表达产物为N-端缺失突变的核糖核酸酶抑制因子。
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| 关 键 词： | 核糖核酸酶抑制因子 缺失突变 毕赤酵母 |
| 文章编号： | 1003-1111(2004)09-0019-04 |
| 修稿时间： | 2004年2月20日 |
Cloning and Expressing of Deletion-Mutagenesis Ribonuclease Inhibitor in Pichia pastoris |
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| WU Yu,WANG Ji-hong,WU Yan-ning,CUI Xiu-yun,ZHAO Bao-chang.Cloning and Expressing of Deletion-Mutagenesis Ribonuclease Inhibitor in Pichia pastoris[J].Fisheries Science,2004,23(9):19-22. |
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| Authors: | WU Yu WANG Ji-hong WU Yan-ning CUI Xiu-yun ZHAO Bao-chang |
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| Institution: | WU Yu~1,WANG Ji-hong~2,WU Yan-ning~2,CUI Xiu-yun~2,ZHAO Bao-chang~2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ribonuclease inhibitor deletion-mutagenesis Pichia pastoris |
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