柑桔高效离体再生系统研究

研究了植物激素、刻伤、放置方式等因子对广柑子叶和上胚轴切段离体再生的影响，建立了一个高效的再生系统。该系统的最佳条件是：采用实生苗子叶和上胚轴茎段作为外植体，MS无机盐＋B5维生素＋5%蔗糖＋0.8%琼脂＋7.5 mg/L BA+1 mg/L NAA（pH 5.7）作为不定梢诱导培养基；子叶沿中间纵切为二,同时在非切面部分横向刻伤,切面朝下与培养基表面接触放置；上胚轴则切成0.5～0.8 cm长的切段，横放于培养基上。培养条件为恒温(26±1) ℃，首先在黑暗下培养15 d，而后转移至16/8 h光/暗周期下, 共经过70 d培养，95%子叶外植体均能发生不定梢，平均每个外植体上发生不定梢数为11.11个，96%的上胚轴切段能发生不定梢，平均每个外植体上发生不定梢数为5个。这一系统再生频率高，操作简便，适用于广柑的遗传转化。