鸡gga-miR-31-5p 启动子真核表达载体的构建及其转录因子结合位点预测 |
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引用本文: | 邓哲宇,王乙婷,王颖洁,胡菜,吴宇慧,赵宗仪,左其生,张亚妮.鸡gga-miR-31-5p 启动子真核表达载体的构建及其转录因子结合位点预测[J].浙江农业学报,2022,34(4):713. |
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作者姓名: | 邓哲宇 王乙婷 王颖洁 胡菜 吴宇慧 赵宗仪 左其生 张亚妮 |
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作者单位: | 扬州大学 动物科学技术学院,江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室,江苏 扬州 225009 |
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基金项目: | 扬州大学大学生科技创新基金(X20190618);扬州大学大学生科技创新基金(X20200642);江苏高校优势学科建设工程 |
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摘 要: | 为确定鸡gga-miR-31-5p启动子基本活性区域,并分析调控其转录的重要转录因子,初步探究影响鸡gga-miR-31-5p的表达调控机制,采用PCR法扩增鸡gga-miR-31-5p启动子,插入到pEGFP-N1载体,构建重组载体。利用菌液PCR及测序鉴定阳性重组质粒。将重组载体转染DF-1细胞系,观察其启动活性。利用在线预测网站预测gga-miR-31-5p启动子区域的转录因子结合位点。结果显示,成功克隆出gga-miR-31-5p启动子片段,并成功构建其pEGFP重组载体。体外转染结果表明,该区域具有启动活性,并发现鸡gga-miR-31-5p启动子区域存在RARα、ER、c-Jun、GR等重要转录因子结合位点。研究初步确定了鸡gga-miR-31-5p启动子区域,同时发现该区域存在重要转录因子结合位点,该结果为后续探讨进一步研究gga-miR-31-5p启动子的生物学功能奠定基础。
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关 键 词: | 鸡 gga-miR-31-5p 启动子 转录因子 |
收稿时间: | 2020-10-12 |
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