检测奶牛乳汁孕酮的免疫生物传感器优化

为了完善已建立的孕酮免疫生物传感器的检测性能,本试验应用碳化二亚胺法将11α-羟基孕酮半琥珀酸和OVA制备成孕酮完全抗原,其浓度达0.6 mg/m L。在此基础上建立了以乳汁为基质的孕酮生物传感器的标准曲线(y=-4.9461x+8.7982,R2=0.993 2),进一步确立了检测乳汁孕酮的线性范围为0.31 ng/m L~50ng/m L,检测限为0.31 ng/m L,灵敏度为0.15 ng/m L,而且孕酮与皮质酮、皮质醇、雄烯二酮的免疫交叉反应较低,表明特异性较好。批内、批间变异系数分别为7.7%和7.5%,回收率为95.8%~115.7%,生物传感器稳定性在4℃保存4 d。该优化的奶牛乳汁孕酮免疫生物传感器的性能参数符合规定的标准,为检测妊娠、乏情和繁殖障碍疾病的奶牛乳汁孕酮含量提供了工具。

Optimization of immune biosensors for milk progesterone in dairy cows