| 猪瘟强弱毒鉴别多重RT-PCR方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 胡建和,杭柏林,王 青.猪瘟强弱毒鉴别多重RT-PCR方法的建立及应用[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(11):47-51. |
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| 作者姓名： | 胡建和 杭柏林 王 青 |
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| 作者单位： | 河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003 |
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| 基金项目： | 河南省高校青年骨干教师资助项目 |
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| 摘 要： | 【目的】建立一种能够应用于临床样本猪瘟病毒(CSFV)检测的快速、简便且标准化程度高的检测技术,以满足畜牧业生产和兽药市场的需求。【方法】根据GenBank中猪瘟病毒及近源病毒的基因组全序列,选择特异保守区域设计了2对猪瘟病毒引物,借助3′端引物碱基错配对PCR扩增效率的影响,优化筛选了能够鉴别猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒疫苗的PCR退火温度,经多重试验组合建立了一套鉴别猪瘟强毒和弱毒的多重RT-PCR鉴别诊断方法。【结果】扩增反应条件的确定试验表明,退火温度为55℃;特异性分析表明,从弱毒C株和石门强毒株的基因组中分别扩增出1条大小为492和178 bp的特异性片段,从强弱毒株混合物中1次扩增出2条大小为492和178 bp的特异性片段,检测不到伪狂犬病病毒的RNA;敏感性分析表明,该方法能检测出0.8 pg的猪瘟病毒RNA;应用试验表明,8份疑似猪瘟病料中5份为强毒感染,2份为弱毒感染,1份为弱毒和强毒的混合感染。【结论】研究建立的多重RT-PCR方法具有敏感性、特异性强、重复性好的特点,对养猪业的发展具有十分重要的意义。
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 多重反转录聚合酶链式反应 鉴别诊断 |
| 收稿时间： | 2007/12/6 0:00:00 |
Foundation and application of multi-RT-PCR method for the differentiation of wild-type and vaccine viruses of classic swine fever virus |
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| HU Jian-he,HANG Bo-lin,WANG Qing,LI Ren-feng,LIU Xing-you,WANG San-hu.Foundation and application of multi-RT-PCR method for the differentiation of wild-type and vaccine viruses of classic swine fever virus[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(11):47-51. |
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| Authors: | HU Jian-he HANG Bo-lin WANG Qing LI Ren-feng LIU Xing-you WANG San-hu |
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| Institution: | (College of Animal Science,Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang,Henan 453003,China) |
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