欧洲葡萄VvJAZ9基因互作蛋白的筛选与验证 |
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引用本文: | 刘德帅,冯美,樊姗姗,孙雨桐,迟敬楠,姚文孔.欧洲葡萄VvJAZ9基因互作蛋白的筛选与验证[J].果树学报,2023(7):1294-1311. |
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作者姓名: | 刘德帅 冯美 樊姗姗 孙雨桐 迟敬楠 姚文孔 |
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作者单位: | 宁夏大学农学院·宁夏优势特色作物现代分子育种重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学地区科学基金项目(31960586);;宁夏自然科学基金(2019AAC03005); |
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摘 要: | 【目的】探究葡萄JAZ家族基因特点及在低温胁迫下的表达情况,以期筛选出与低温胁迫相关的家族成员,并进一步筛选其互作蛋白,为后续葡萄抗寒机制研究提供理论依据。【方法】以拟南芥和葡萄基因组数据为基础,获得葡萄JAZ家族成员基因并进行同源克隆、染色体定位、理化性质以及蛋白家族聚类等分析,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术分析VvJAZ家族成员基因在低温胁迫下的表达情况,应用酵母双杂交技术进行互作蛋白筛选和验证,并通过双分子荧光互补试验验证候选互作蛋白与VvJAZ9蛋白的互作关系。【结果】葡萄中有11个JAZ家族基因,随机分布于7条染色体上,都具有JAZ家族蛋白中特有且高度保守的TIFY和Jas结构域,均属于碱性不稳定亲水蛋白;聚类分析表明,葡萄JAZ家族蛋白可分为3个亚族,其中VvJAZ9与拟南芥AtJAZ1和AtJAZ2的亲缘关系最近,VvJAZ1与VvJAZ11、VvJAZ5与VvJAZ6同源关系最近。qRT-PCR结果表明,VvJAZ9是葡萄JAZ家族成员基因中受低温诱导表达最为明显的1个基因。通过酵母双杂交试验筛选获得2...
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关 键 词: | 欧洲葡萄 JAZ基因家族 蛋白互作 低温胁迫 表达分析 |
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