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H5亚型AIV HA基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达
引用本文:詹爱军,王新卫,王敬师,周庆丰,马静云,毕英佐,于康震.H5亚型AIV HA基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达[J].中国家禽,2007,29(15):20-23.
作者姓名:詹爱军  王新卫  王敬师  周庆丰  马静云  毕英佐  于康震
作者单位:1. 华南农业大学动物科学学院,广东广州,510642
2. 河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002
3. 中国兽药监察所,北京,100081
摘    要:应用DNAStar软件,参照GenBank中注册的AIV H5亚型毒株HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H5亚型AIV的HA基因,通过BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切位点将H5 HA基因插入转移质粒载体pFastBacHTa中,获得重组转移载体pFastBacHTa-H5HA并将其转化DH10Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H5HA,再将其转染昆虫细胞High Five,PCR鉴定证实该基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经SDS-PAGE和Western blotting检测,HA基因在High Five细胞中得到了表达,表达产物大小约为67 ku,而且具有特异的免疫反应性.

关 键 词:禽流感病毒  血凝素蛋白  昆虫细胞  克隆
修稿时间:2007年4月23日

Cloning of Structural Protein HA Gene of H5N1 Avian Influenza Virus and its Expression in Insect Cells
Zhan Aijun,Wang Xinwei,Wang Jingshi,Zhou Qingfeng,Ma Jingyun,Bi Yingzuo,Yu Kangzhen.Cloning of Structural Protein HA Gene of H5N1 Avian Influenza Virus and its Expression in Insect Cells[J].China Poultry,2007,29(15):20-23.
Authors:Zhan Aijun  Wang Xinwei  Wang Jingshi  Zhou Qingfeng  Ma Jingyun  Bi Yingzuo  Yu Kangzhen
Abstract:
Keywords:avian influenza virus  HA protein  insect cell  cloning
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