直接多重TaqMan qPCR方法快速鉴定褐飞虱属3种飞虱 |
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引用本文: | 罗举,杨素文,贝文勇,余军伟,唐健,刘淑华.直接多重TaqMan qPCR方法快速鉴定褐飞虱属3种飞虱[J].中国水稻科学,2023(3):329-336. |
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作者姓名: | 罗举 杨素文 贝文勇 余军伟 唐健 刘淑华 |
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作者单位: | 1. 中国水稻研究所;4. 杭州优思达生物技术有限公司 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金资助项目(LGN21C140002);;十四五重点研发计划资助项目(2021YFD1401100);;水稻生物学国家重点实验室开放课题(20210303);;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(CPSIBRF-CNRRI-202123); |
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摘 要: | 【目的】褐飞虱(Nilaparvata lugens)是水稻重大害虫,灯光诱捕一直是褐飞虱监测的重要方法。然而,褐飞虱的两个同属近似种伪褐飞虱(N. muiri)和拟褐飞虱(N. bakeri)也具有扑灯行为,常被误判为褐飞虱。针对测报灯下褐飞虱属近似种形态鉴定费时费力、专业技能要求高,伪褐飞虱和拟褐飞虱常被误判为褐飞虱这一问题,拟建立一种褐飞虱属3种飞虱的快速分类鉴定方法。【方法】以条形码基因ITS1为靶标,筛选褐飞虱属通用引物及物种特异性探针,建立并优化直接多重Taqman qPCR检测体系(Direct Multiplex TaqMan quantitative PCR,dmTqPCR),并分析其特异性、灵敏度及实用性。【结果】本研究建立的3种飞虱dmTqPCR检测方法特异性强,可准确区分褐飞虱、伪褐飞虱和拟褐飞虱;灵敏度高,检出限可达10拷贝/反应;大样本检测结果表明,382个样本从样本获取到结果输出的整个过程可在3 h内完成,检出率及准确率均为100%。【结论】本研究建立的褐飞虱属近似种的dmTqPCR鉴定方法可以用于褐飞虱、伪褐飞虱和拟褐飞虱的快速分类鉴定,有利于灯下褐飞虱...
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关 键 词: | 褐飞虱 伪褐飞虱 拟褐飞虱 ITS1 直接多重Taqman qPCR |
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