农杆菌介导的籼稻9311和华占遗传转化体系的研究

【目的】水稻转基因技术是推动水稻分子生物学研究和精准育种的重要工具。农杆菌介导法是水稻遗传转化的主流方法。然而受基因型限制，典型籼稻的转化效率仍然偏低，需提高其转化效率。【方法】以顽拗型籼稻品种9311和华占为受体材料，研究了不同大量元素、微量元素、有机物和碳源的组合，植物激素浓度，侵染培养基，乙酰丁香酮（AS）浓度和光周期对遗传转化效率的影响。【结果】在成熟种子组织培养试验中，MS大量元素、B5微量元素、N6有机物和麦芽糖为9311最优组合，华占最优组合为MS大量元素、MS微量元素、MS有机物和麦芽糖。诱导培养基中添加0.5mg/L的BAP或1.5mg/L的KT可显著提高9311和华占的组织培养再生率，可达70.0%以上。在侵染过程中，添加100μmol/LAS的转化效率高于200μmol/LAS。光周期实验显示9311和华占宜采用不同的光周期策略，9311在全黑暗条件下进行愈伤诱导和筛选，在全光照条件下进行分化，转化效率最高，达6.0%～6.4%，而华占在12h光照/12h黑暗条件下进行诱导、筛选和分化，获得的转化效率最高（5.0%～7.5%）。【结论】本研究优化了顽拗型籼稻931...