猪瘟疫苗中BVDV污染一步法RT-PCR检测方法的建立与应用 |
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引用本文: | 葛玉凤,崔治亮,高广仁,刘学荣,武发菊,安芳兰.猪瘟疫苗中BVDV污染一步法RT-PCR检测方法的建立与应用[J].黑龙江畜牧兽医,2018(2). |
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作者姓名: | 葛玉凤 崔治亮 高广仁 刘学荣 武发菊 安芳兰 |
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作者单位: | 中农威特生物科技股份有限公司; |
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摘 要: | 为建立一种快速检测猪瘟(CSF)疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染的方法,试验根据GenBank上登录的BVDV 5'端非编码区基因组序列设计1对引物,经一步法RT-PCR反应条件的优化,建立了检测猪瘟疫苗中BVDV污染的一步法RT-PCR。结果表明:该方法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒的扩增结果均为阴性,对BVDV基因组RNA的检测灵敏度达0.1 ng,与细胞培养法的符合率达100%。应用该方法对猪瘟疫苗、牛血清等138份样品进行BVDV污染的检测,阳性污染率达11.59%。该一步法RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性,可用于猪瘟疫苗生产中血清、细胞、毒种、半成品等的质量控制及猪瘟疫苗临床应用中的质量检验。
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