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| 反转录病毒介导的稳定表达HIV-1Gag蛋白和增强型绿色荧光蛋白细胞系的建立 | |
| 引用本文： | 王婧,李昌,李林溪,胡博,丛艳昭,任大勇,王卓越,杜寿文,金宁一.反转录病毒介导的稳定表达HIV-1Gag蛋白和增强型绿色荧光蛋白细胞系的建立[J].畜牧兽医学报,2011,42(2). |
| 作者姓名： | 王婧 李昌 李林溪 胡博 丛艳昭 任大勇 王卓越 杜寿文 金宁一 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学,畜牧兽医学院,长春,130062 2. 军事医学科学院,全军基因工程重点实验室,长春,130062 3. 延边大学,农学院,龙井,133400 4. 吉林大学,畜牧兽医学院,长春,130062;军事医学科学院,全军基因工程重点实验室,长春,130062 |
| 基金项目： | 重大传染病专项(2008ZX10004-015); 军内十一五科技攻关项目(06G127); 吉林省高新技术产业发展项目(2010); 长春市科技特派员行动计划(09KT04) |
| 摘 要： | 本研究旨在建立中国流行株人免疫缺陷病毒(HIV-1)衣壳蛋白(Gag)哺乳动物稳定表达细胞系。将HIV-1核心蛋白基因gag和增强型绿色荧光蛋白基因EGFP依次串联插入反转录病毒载体pFB-neo,构建重组反转录病毒载体pFB-gag-EGFP,并与含有辅助病毒gag-pol和env基因的质粒pVPack-GP、pVPack-10A1共转染HEK293T细胞,包装出的反转录病毒感染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白EGFP表达,验证HIV-1核心蛋白Gag表达,G418抗性筛选阳性细胞。结果表明,HIV-1核心蛋白Gag和增强型绿色荧光蛋白可在SP2/0细胞中稳定表达,HIV-1核心蛋白gag基因稳定表达细胞系成功建立,为抗AIDS治疗用基因工程制剂及靶向药物的活性检测提供了理想方法。 |
| 关 键 词： | 反转录病毒载体 人免疫缺陷病毒 核心蛋白 增强型绿色荧光蛋白 小鼠骨髓瘤细胞SP2/0 |
Continuously Expressing HIV-1 Gag and EGFP by Retroviral Vector Induced SP2/0 Cell Lines |
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| WANG Jing,LI Chang,LI Lin-xi,HU Bo,CONG Yan-zhao,REN Da-yong,WANG Zhuo-yue,DU Shou-wen,JIN Ning-yi.Continuously Expressing HIV-1 Gag and EGFP by Retroviral Vector Induced SP2/0 Cell Lines[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2011,42(2). | |
| Authors: | WANG Jing LI Chang LI Lin-xi HU Bo CONG Yan-zhao REN Da-yong WANG Zhuo-yue DU Shou-wen JIN Ning-yi |
| Institution: | WANG Jing1,LI Chang2,LI Lin-xi1,HU Bo1,CONG Yan-zhao3,REN Da-yong1,WANG Zhuo-yue1,DU Shou-wen1,JIN Ning-yi1,2 (1.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun130062,China,2.Genetic Engineering Laboratory of PLA,Academy of Military MedicalSciences of PLA,Changchun 130062,3.College of Agriculture,Yanbian University,Longjing 133400,China) |
| Abstract: | To construct a retroviral vector mediated mammalian cell expression cell line of the human immunodeficiency virus(HIV-1) core protein,the recombinant retroviral vector pFB-gag-EGFP was constructed by inserting core protein gene gag of HIV-1 and enhanced green fluorescent protein gene EGFP into pFB-neo by turns.The recombinant retroviral vector,the pVPack-GP plasmid containing the helper virus gag-pol gene and pVPack-10A1 plasmid containing env gene were cotransfected into packaging cell line HEK-293T with l... |
| Keywords: | retroviral vector HIV-1 core protein enhanced green fluorescent protein SP2/0 cells |
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