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枯草芽胞杆菌ZJF-1A5的β-葡聚糖酶热稳定性改造及酶学性质分析
引用本文:张秀艳,阮晖,傅明亮,何国庆,李青青.枯草芽胞杆菌ZJF-1A5的β-葡聚糖酶热稳定性改造及酶学性质分析[J].农业生物技术学报,2007,15(3):508-513.
作者姓名:张秀艳  阮晖  傅明亮  何国庆  李青青
作者单位:1. 华中农业大学食品安全与微生物学系,武汉,430070
2. 浙江大学食品科学与营养系,杭州,310029
摘    要:利用定向进化技术对来自枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)ZJF-1A5的β-葡聚糖酶基因进行改造,并对野生酶和突变酶的酶学性质进行研究。获得了2株可以产较高热稳定性酶的突变体,分别被命名为EGs1和EGs2。酶学性质分析结果显示,与野生酶相比,EGs1和EGs2突变酶的半失活温度分别提高了3和5℃,达到了65.5和67.5℃;突变酶的最适反应温度也提高了5℃,达到了60℃;2个突变酶对地衣多糖的水解能力分别提高28%和降低21.6%;对地衣多糖的亲和力未见改变;野生酶和EGs1突变酶最适pH6.5,而EGs2突变酶最适pH7.0;野生型和突变型β-葡聚糖酶都有较宽的pH稳定范围,在pH6.0~8.5的范围内放置48h,仍保持80%以上的酶活力。遗传稳定性检验结果表明,突变株的遗传稳定性良好。

关 键 词:枯草芽胞杆菌ZJF-1A5  β-葡聚糖酶  定向进化  热稳定性
文章编号:1006-1304(2007)03-0508-06
收稿时间:2006-08-01
修稿时间:2006-08-012006-11-15

Improving Thermostability of β-glucanase from Bacillus subtilis ZJF- 1A5 and Analyzing Enzyme Properties of Mutants
ZHANG Xiu-yan,RUAN Hui,FU Ming-liang,HE Guo-qing,LI Qing-qing.Improving Thermostability of β-glucanase from Bacillus subtilis ZJF- 1A5 and Analyzing Enzyme Properties of Mutants[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2007,15(3):508-513.
Authors:ZHANG Xiu-yan  RUAN Hui  FU Ming-liang  HE Guo-qing  LI Qing-qing
Institution:1. Department of Food Chemistry and Molecular Biology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China; 2. Department of Food Science and Nutrition, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China
Abstract:
Keywords:
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