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| 新型鸭呼肠孤病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 袁远华,吴志新,王俊峰,黄兴国,贺东生,黄淑坚.新型鸭呼肠孤病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(9). |
| 作者姓名： | 袁远华 吴志新 王俊峰 黄兴国 贺东生 黄淑坚 |
| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院,广东广州510642;佛山科学技术学院生命科学学院,广东佛山528231 2. 三水区乐平镇动物防疫检疫站,广东佛山,528137 3. 韶关市动物卫生监督所,广东韶关,512026 4. 佛山科学技术学院生命科学学院,广东佛山,528231 5. 华南农业大学兽医学院,广东广州,510642 |
| 摘 要： | 为建立一种快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的方法,本研究参考GenBank中登录的NDRV S3基因保守序列设计特异性引物,建立了一种检测NDRV的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性和重复性进行检验,并与普通PCR进行比较.结果显示,扩增标准曲线相关系数为0.9996,扩增产物的熔解曲线仅出现单特异峰.对番鸭呼肠孤病毒、禽呼肠孤病毒、鸭病毒性肝炎病毒、鸭瘟病毒、鸭新城疫病毒和禽流感病毒均未检测到荧光信号.对NDRV的最小检出量为29拷贝/μL,比普通PCR敏感性高100倍.组内和组间变异系数均小于2％,重复性好.该检测方法的建立为NDRV早期快速检测及定量分析提供新的方法. |
| 关 键 词： | 新型鸭呼肠孤病毒 SYBR Green Ⅰ 实时荧光定量RT-PCR |
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