| 油松苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建及表达分析 |
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| 引用本文： | 魏宁,樊军锋,徐华.油松苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建及表达分析[J].西北林学院学报,2013,28(5). |
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| 作者姓名： | 魏宁 樊军锋 徐华 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学林学院,陕西杨陵,712100
2. 陕西省林业厅种苗站,陕西西安,710082 |
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| 基金项目： | 油松高世代育种材料的创造、测定及选择研究，林业公益性行业科研专项 |
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| 摘 要： | 利用基因重组技术,以油松PAL基因(TaPAL) CDS区(2 157 bp)作为外源基因的同源重组片段,构建了pET-28a-TaPAL重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达并进行分析.经SDS-PAGE电泳检测,在分子量80 KD处获得一条特异蛋白的表达条带,且其大小与预期相符.在温度28℃,IPTG浓度1.5 mmol· L-1,时间3h条件下,重组质粒的表达量最大.可溶性分析表明,在最佳诱导条件下,该蛋白主要以包涵体形式存在.粗酶活性测定表明,粗酶(在20℃、IPTG浓度1 mm01·L-1条件下诱导10 h)比活力为55.3μmol·min-1·gpro-1,即55.3U·g-1.构建的pET-28a-TaPAL重组载体能够在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出具有生物活性的融合蛋白.
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| 关 键 词： | 油松 苯丙氨酸解氨酶 原核表达 分析 |
Prokaryotic Expression Vector Construction and Analysis of Phenylalanine Ammonia-Lyase of Pinus tabulaeformis |
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| WEI Ning
,
FAN Jun-feng
,
XU Hua.Prokaryotic Expression Vector Construction and Analysis of Phenylalanine Ammonia-Lyase of Pinus tabulaeformis[J].Journal of Northwest Forestry University,2013,28(5). |
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| Authors: | WEI Ning FAN Jun-feng XU Hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pinus tabulaeformis phenylalanine ammonia-lyase prokaryotic expression analysis |
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